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多肽的纯度、含量、总重与实际重量

来源:昊德生物时间:2010-11-13阅读量:

定义

     根据总重和HPLC分析的纯度,样品中目的肽的含量是如何确定的呢?我公司的多肽发货时是以总重来计算的,也就是肽冻干后的实际重量,其中包括在冻干过程中,其它杂质如残留的水分、来自带相反电荷离子的盐分等的重量。
  肽的纯度是指在波长220nm时样品中目的肽所占的比例,样品中可能含有缺失序列、短片段、脱保护不完全的序列等等。肽的纯度是在肽的最大吸收峰220nm处由HPLC分析而得到的,肽中一般还含有水分和盐分,但肽的纯度没有把它们计算在内。
  肽的含量是指所有肽在样品中所占的百分比,样品中包含所有的肽及水分、盐分等,肽的含量通过氨基酸分析得到。
  目的肽的绝对含量是指在样品中目的肽的纯度与其含量的乘积。

      多肽冻干粉末的重量中不仅仅包含多肽,还包含有一些非肽的组份,如水,被吸收的溶剂、配位离子和盐等。肽的净含量是指肽在其中的重量百分比,这个百分比的数值范围很大,可能从50%到90%,取决于纯度、序列以及合成和纯化的方法,不要将肽的净含量和肽的纯度混为一谈,它们是完全不同的两个概念。纯度通常是由HPLC决定的。纯度定义的是多肽样品中含正确序列的组分的百分比,而肽的净含量是指样品中肽类物质相对于总物质所占的百分比,肽的净含量通常是用氨基酸组分分析或紫外分光法测定的。这个信息主要是在一些对肽的浓度很敏感的实验中,对计算肽的浓度是很重要的

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